一、PCR實驗室裝修知識

這里著重介紹PCR實驗室裝修的功能區(qū)劃分，建議從3方面來考慮，即：普通實驗區(qū)、污染控制區(qū)、氣流組織。

　　1.普通實驗區(qū)：包括產(chǎn)物分析區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、試劑準(zhǔn)備區(qū)這4個區(qū)域。

2.污染控制區(qū)：此區(qū)域的規(guī)劃有3套方案，第1套為各功能間相互串通，以套間方式進(jìn)入人流/物流;第2套為設(shè)置獨立緩沖間，人流/物流分道，流程相鄰間設(shè)置物流傳遞窗;第3套為設(shè)置共用緩沖間/緩沖走廊。

3.?氣流組織：PCR實驗室裝修的氣流組織需要從原始試劑混配室、DNA提取室、PCR擴(kuò)增室、檢測室、送風(fēng)口這5方面來考慮。

　　①原始試劑混配室：房間壓差為正壓，配備有潔凈工作臺，以防止其他功能間對本房間的污染。

　　②DNA提取室：房間壓差為負(fù)壓，配備有排風(fēng)系統(tǒng)，以防止提取核酸產(chǎn)生的氣溶膠對工作人員的傷害及擴(kuò)散污染。

　　③PCR擴(kuò)增室：房間壓差為負(fù)壓，與DNA提取室一樣，配備有排風(fēng)系統(tǒng)，以防止擴(kuò)增產(chǎn)物造成的擴(kuò)散污染。

　　④檢測室：房間壓差為負(fù)壓，與DNA提取室、PCR擴(kuò)增室一樣，配備有排風(fēng)系統(tǒng)，以防止相關(guān)污染。

⑤送風(fēng)口：采用的是頂送風(fēng)，側(cè)下回/排風(fēng)方式。

二、PCR實驗室設(shè)計知識

這里著重介紹PCR走廊、傳遞窗這2方面的最新知識。

1. PCR走廊：并不是標(biāo)配，進(jìn)深不夠時不要做PCR走廊，且PCR走廊會增加交叉污染。

Tips：這4個分區(qū)(試劑儲存和準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、核算擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū))原本就不需連接在一起。且在物理空間上必須是完全相互獨立的，各區(qū)域無論在空間上還是在使用中，應(yīng)當(dāng)始終處于完全的分隔狀態(tài)，不能有空氣的直接相通。

2.?傳遞窗：并非必須設(shè)置(只要不涉及潔/污分流就不需要設(shè)置傳遞窗)，但一般實驗機(jī)構(gòu)/實驗人員喜歡設(shè)置。

Tips：傳遞窗的本質(zhì)——同緩沖間，是物流的緩沖間。在PCR實驗室設(shè)計中，試劑準(zhǔn)備和標(biāo)本制備間是重點保護(hù)的區(qū)域，此處最好不要加傳遞窗，防止交叉污染。實驗中的污染風(fēng)險主要來自于核酸擴(kuò)增時的加樣行為，但由于操作在生物安全柜(起超凈臺的作用，最新做法)內(nèi)進(jìn)行，且確?？諝獠煌庖?，因此不存在污染。